싸토리우스의 고처리량 스크리닝(HTS) 세포분석

0.2~150마이크로미터 크기의 모든 부유 입자 또는 세포가 분석에 적합합니다. 고체 조직의 세포는 분석 전에 분산되어야 합니다.

추가 정보를 수집하기 위해 세포는 형광 분자로 표지될 수 있습니다. 특히, 형광 표지된 항체는 세포 표면의 단백질(항원)에 결합될 수 있습니다. 세포가 많은 항원을 가지고 있다면, 많은 수의 형광 표지된 항체가 결합되어 강한 형광 신호를 생성합니다. 항원이 없거나 적은 세포는 약한 형광 신호를 생성합니다.

형광 표지자(예: 형광단 접합 항체)는 관심 있는 에피토프를 직접 표적화하여 그 생물학적 및 생화학적 특성을 측정할 수 있게 합니다. 형광 표지자는 세포 집단, 세포 표면 수용체, 세포 내 표적 식별 및 정량화, 세포 분류, 면역표현형 분석, 세포자멸사 연구 등 다양한 어플리케이션에서 유용합니다.

유세포분석 실험에서 검사 지점을 통과하고 검출되는 모든 세포는 개별 이벤트로 계수됩니다. 검출되는 각 광원 유형(전방산란, 측방산란, 그리고 각기 다른 형광 방출 파장)은 고유한 채널을 가집니다.

각 이벤트의 데이터는 각 채널에서 검출된 광신호 강도를 독립적으로 도시합니다. 이 데이터는 다양한 방식으로 시각화될 수 있으며, 유세포분석에서 가장 흔히 사용되는 데이터 그래프 유형은 히스토그램, 도트 플롯, 등고선 다이어그램입니다.

히스토그램

히스토그램은 일반적으로 두 개 이상의 집단의 형광 강도를 비교하는 데 사용됩니다.

닷 플롯

닷 플롯은 각 이벤트가 단일 점(또는 도트)으로 표현되는 산점도에서 동시에 2~3개의 매개변수를 비교합니다. 닷 플롯은 여러 변수 간의 관계를 한 번에 보여주는 그림으로, 매개변수는 산란 및 형광 신호의 모든 조합이 가능합니다.

등고선 그래프

등고선 그래프는 수집된 이벤트 수와 관계없이 모집단의 상대적 빈도를 표시합니다. 등고선 다이어그램은 유사한 세포 수를 나타내는 선으로 연결된 확률 등고선을 표시합니다. 모집단 주변에 동심원이 형성되어 밀도가 높을수록 등고선 다이어그램에서 원이 더 가깝게 위치합니다.

iQue 세포 증식 및 라벨링(V/블루) 염료로 밝게 라벨된 Raji 세포, 인코더 염료로 희미하게 라벨된 Ramos 세포, 라벨되지 않은 Jurkat 세포를 CDC 분석을 위해 혼합(5K/웰)하고 인코더 염료 형광에 따라 분리하여 히스토그램에 표시했습니다. (iQue Forecyt의 사전 정의된 게이트의 점 그래프 예시는 인간 T세포 하위 집단의 자동 표현형 분석을 가능하게 합니다. (CD14 양성 모집단을 명확하게 게이팅한 등고선 그래프.

유세포분석은 면역학, 분자생물학, 세균학, 바이러스학, 암생물학 및 감염병 모니터링에 적용되는 강력한 도구입니다. 유세포분석의 가장 흔한 어플리케이션은 면역표현형 분석입니다. 이는 표면 마커, 사이토카인 분석 및 세포 건강과 같은 다중 파라미터에 대해 혼합된 세포 집단을 동시에 분석할 수 있는 유세포분석의 고유한 능력을 활용합니다.