질병 모델링의 변동성 감소를 위한 고급 도구
3D 세포 배양 및 2D 줄기세포 모델과 같은 첨단 세포 기반 접근 방식이 인간 질병 모델을 만드는 데 점점 더 많이 사용되고 있으며, 연구자들은 통제된 환경에서 질병의 발생, 진행 및 근본적인 병인을 연구할 수 있습니다.
3D 세포 배양 모델은 질병 특이 오가노이드와 같이 장기 조직 구조와 행동을 더 잘 요약하므로 기존의 2D 배양 및/또는 동물 모델보다 큰 이점을 제공합니다.
환자별 표현형을 더 잘 모방할 수 있는 잠재력으로 인해 유도만능줄기세포(iPSC)는 인간화된 질병 모델을 대량으로 생성할 수 있는 훌륭한 공급원입니다. 조직 질환, 유전 질환(예: 망막색소변성증), 감염병(예: 호흡기, 위장), 퇴행성 질환(예: 낭포성 신장 질환, 알츠하이머병) 및 암의 iPSC 유래 오가노이드 모델을 구축할 수 있는 길을 제공합니다.
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클래식 미디어 살펴보기
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라벨링을 수행할 필요 없이 생리학적 관련 환경에서 3D 및 2D 세포 배양의 표현형 또는 기능적 변화를 실시간으로 모니터링하고 특성화할 수 있습니다. Incucyte® 소프트웨어를 사용하면 살아있는 세포의 이미지를 획득, 확인, 분석 및 공유하는 프로세스가 그 어느 때보다 쉬워집니다.
Incucyte® 오가노이드 분석 살펴보기
보르기, R.; 마글리오카, V.; 페트리니, S.; 콘티, L.A.; 모레노, S.; 베르티니, E.; 타르탈리아, M.; 콤파그누치, C. 환자별 신경 발생 모델을 활용하여 집단 간질에서 PCDH19의 역할 해부하기. J. Clin. Med. 2021, 10, 2754. https://doi.org/10.3390/jcm10132754
적용분야 노트 보기
셀셀렉터 플렉스 플랫폼은 단일 세포, 클러스터, 스페로이드 및 오가노이드는 물론 단일 세포 클로닝 및 부착 콜로니의 선별, 선택 및 분리를 위해 개발된 완전 자동화된 세포 이미징 및 채취 시스템입니다.
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미세 유체 수집 기능은 384웰 형식으로 최소 1uL의 샘플 부피 요구량만큼 작은 샘플을 데드 볼륨이 없는 상태로 분석할 수 있습니다. 세포 감지는 초당 수천 개의 세포 속도로 이루어집니다.
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그림 2 - iQue® 3을 사용한 3D 종양 스페로이드의 ICK 분석 프로토콜을 개략적으로 설명하는 모식도
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동적 모니터링을 위한 Incucyte® 실시간 세포 분석 시스템과 오가노이드 성장 또는 사멸의 시간적 평가를 간소화하고 용이하게 하는 Incucyte® 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈을 함께 사용하여 하나의 실험에서 더 많은 정보를 얻을 수 있습니다.
관련 T 세포 특성화 시약 키트와 검증된 스페로이드 세척 및 해리 프로토콜이 포함된 iQue®3 고처리량 스크리닝 세포 분석기는 고급 3D 종양 모델에서 T 세포 반응을 평가하기 위한 엔드투엔드 솔루션을 제공합니다.
이 온디맨드 웨비나에서는 전문가들이 뇌 오가노이드를 사용하여 신경 발달과 뇌의 진화를 연구하는 방법을 공유합니다.
오가노이드 모델을 효과적으로 사용하기 위해서는 구체적이고 신뢰할 수 있는 배양 및 분석 방법이 필요한데, 그 방법을 알아보세요.
배양 조건의 최적화와 인간 iPSC 유래 뉴런의 세포 건강 평가를 위한 정량적 라이브 셀 분석.
오가노이드 분석 소프트웨어 모듈이 포함된 Incucyte® 생세포 분석 시스템이 어떻게 오가노이드의 성장 또는 사멸 평가를 간소화할 수 있는지 알아보세요.
Incucyte®️ 생세포 분석 시스템용 단일 스페로이드 준비에 피커스 피펫을 활용하는 방법을 알아보세요.
Incucyte®플랫폼은 여러 주요 지표를 동역학적이고 객관적으로 정량화하는 데 사용할 수 있습니다(예:, 형성, 성장 및 형태)를 정량화하여 장시간 배양 기간 동안 오가노이드 확장 및 성장 효율성을 평가할 수 있습니다.
형태 지표는 세포 유형에 따라 다르며 장 오가노이드의 경우 싹트기 및 내강 내 파편 축적과 같은 성숙 지표를 포함합니다.
Incucyte® 플랫폼을 통해 오가노이드 편심(물체 원형도) 및 어두움(물체 밝기)의 변화를 실시간으로 추적하면 최적의 배양 통과 기간을 빠르고 공정한 평가가 가능해집니다.
기존의 많은 방법은 분석을 위해 형광 프로브로 세포를 라벨링해야 하지만, 라벨링은 생물학적 반응을 교란할 수 있으며 일차 조직에는 적합하지 않은 경우가 많습니다.
Incucyte® 생세포 분석 시스템(인큐사이트 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈과 함께 사용)을 사용하면 기본 생물학을 조작할 필요 없이(예: GFP와 같은 형광 단백질의 재조합 발현을 통해) 라벨 없는 생세포 이미징을 통해 연구자의 시간을 절약하고 형광 프로브로 인한 교란을 피할 수 있습니다.
기존에 2D로 배양한 암 세포주를 스캐폴드 없이 또는 스캐폴드 기반 기술을 사용하여 3D 스페로이드 제작에 사용할 경우, 2D 배양에 권장되는 배지를 사용하고 있습니다. 3D 오가노이드를 배양할 때는 특수 오가노이드 배지를 사용하고 있습니다.
일반적으로 채택되는 한 가지 방법은 단일 종양 스페로이드가 마트리겔 또는 콜라겐과 같은 세포외기질로 침입하는 것입니다. 여기서는 접착력이 낮은 플레이트에 단일 스페로이드를 생성한 다음 동일한 웰에 마트리겔을 직접 추가하여 종양 세포가 침입할 수 있는 반고체 매트릭스를 제공합니다.
이 방법의 장점은 스페로이드 크기를 정밀하게 제어하여 전이성 고형 종양의 규명된 미세 영역을 모방할 수 있고 침입 분석이 현장에서 수행되므로 다른 방법론에서 흔히 사용되는 스페로이드를 두 번째 플레이트로 옮길 필요가 없다는 점입니다. 또한 이 방법은 자동화된 생세포 분석과도 호환성이 높습니다.
셀셀렉터는 냉각 데크 트레이를 사용하여 하이드로젤 온도를 ~0°C로 유지하여 오가노이드 구조가 증착되기 전에 중합을 방지할 수 있습니다.
자동 형태 측정 및 게이팅이 가능하며 면적, 직경, 구형도, 인접 오가노이드의 존재 여부 등 다양한 형태학적 파라미터를 기반으로 바람직한 오가노이드를 식별합니다.
또한 매우 부드러운 이송으로 인해 오가노이드의 형태와 구조가 유지됩니다.
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