B세포 | 싸토리우스

실시간 라이브 세포 분석을 통한 B세포 적응 면역 이해

B-세포

B 세포는 적응 면역 체계의 중심에 있으며 침입 병원체에 대항하는 항원 특이 면역 글로불린의 생산을 담당합니다. B세포 활성화와 증식은 항체 분비에 중요하지만 지속적인 자극은 호지킨 림프종 및 비호지킨 림프종과 같은 B세포 백혈병과 림프종의 생존과 성장으로 이어질 수 있습니다.

인큐사이트 생세포 분석 시스템은 활성화 및 클러스터링, 항체 내재화 분석 등 B세포의 주요 기능을 평가하는 데 사용되었으며, 세포자멸사 및 면역세포 사멸 분석을 통해 B세포암의 세포사멸을 평가하는 데도 사용되었습니다.


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활성화 및 클러스터링

비접착성 B 세포주의 증식 위상차 이미지에서 정량화된 B 세포주인 WIL-2NS 세포의 증식. 예상대로 시작 합류는 시딩 밀도에 따라 달라집니다. 웰당 알려진 양의 세포를 시딩하여 침강을 허용한 다음 위상차 알고리즘을 사용하여 정량화함으로써 합류 측정의 밸리데이션을 수행했습니다. 또한, 세포를 투과시키고 ATP 함량을 측정하여 2차 판독값을 제공했습니다. 합류율과 세포 수 또는 ATP 측정 간에 매우 강한 상관관계가 관찰되었습니다.

세포자멸사 (아넥신 V 그린)

세포독성 챌린지 후 B 세포의 세포자멸사를 측정합니다. 매개체 또는 캠토테신(1 µM)에 노출된 후 24시간 후 촬영한 WIL2-NS B 림프종 세포의 대표 이미지를 Incucyte® 아넥신 V 그린 시약의 존재 하에서. 시간 흐름은 Incucyte® 아넥신 V 그린 시약에서 나오는 녹색 형광의 증가를 나타내며, 이는 캠토테신에 의해 유도된 외부화된 포스파티딜세린의 농도에 따른 시간 및 농도 의존적 증가를 나타냅니다. 

면역 세포 사멸

백혈병 세포의 ADCC를 측정합니다. 무처리 또는 IL-2(10ng/mL) & IL-12(10ng/mL) 또는 리툭산(15ng/mL - 100 ug/mL)이 존재하는 면역 세포에서 NucLight® 적색 핵 표지자를 발현하는 Ramos B 림프구의 혼합 위상 및 형광 이미지. 세포독성은 적색 형광 강도의 손실을 기준으로 정량화했습니다.

항체 내재화 정량화

임상에서 사용되는 항체 리툭산의 내재화. 라지(B 세포 유사) 세포(30K/웰)를 Incucyte® FabFluor로 표지된 리툭산(10ng/mL ~ 10µg/mL)으로 처리했습니다. 12시간 동안 20배 대물렌즈를 사용하여 30분마다 HD 위상 및 적색 형광 이미지를 캡처했습니다. 모든 데이터는 최소 4개 웰 ± SEM의 평균으로 표시되며, 시간 경과 데이터는 정규화된 빨간색 영역(빨간색 영역/위상 영역)으로 표시됩니다.

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