고객의 고유한 요구에 맞는 지능형 도구, 서비스 및 솔루션을 통한 세포주 개발

일반적으로 독성학 및 최초의 인간 임상 자료는 모두 동일한 클론 유래 세포를 사용하여 생성되므로 안전성을 보장하고 개발 위험을 최소화할 수 있습니다. 그러나 단일 세포 클로닝을 통한 세포주 개발은 세포주 안정성과 제조 가능성을 기반으로 리드 클론을 선별하는 데 많은 시간이 소요되며, 이로 인해 시간이 더 많이 소요됩니다. 보다 빠른 일정을 달성하기 위해 여러 클론 풀을 사용하여 규제 제출이 가능한 독성 연구를 위한 약물 물질을 조기에 생산하고 나중에 임상 물질 생산을 위해 최종 단일 클론을 선택하는 접근 방식이 있습니다.

번역 후 조작은 진핵세포에서 단백질이 생산되는 동안 흔히 일어나는 현상입니다. 여기에는 아세틸화, 아미드화, 카르복실화, 인산화 및 글리코실화와 같은 다양한 화학적 변형이 포함됩니다. 이러한 중요한 화학적 변형은 단백질 폴딩, 안정성 및 기능에 필수적입니다.

이러한 다양한 번역 후 조작 중 글리코실화는 단백질에 당 모티어가 공유 결합하는 것을 포함하기 때문에 변형의 화학적 이질성 관점에서 가장 복잡한 변형이다. 글리코실화에는 두 가지 일반적인 유형이 있습니다: O-결합 글리코실화와 N-결합 글리코실화입니다.

글리코실화 패턴은 아푸코실화된 단일클론항체(mAb)와 같이 단백질의 생리활성에서 중요한 역할을 합니다.

중국 햄스터 난소(CHO) 세포와 같은 포유동물 세포를 통한 치료 항체 생산 중 N-결합 글리코실화가 일반적으로 관찰됩니다. IgG1 유형의 항체의 경우, 중쇄 Fc 영역에 글리코실화를 위한 보존된 부위가 있습니다. 번역 후 조작 과정에서 여러 당 모티어(예: N-아세틸글루코사민(GlcNAc), 만노스, 푸코스, 갈락토스)가 복잡한 조합으로 조립되어 다양한 글리코실화 패턴을 형성할 수 있습니다. 포유류 세포주 엔지니어링을 포함한 업스트림 공정에서 주로 발전이 이루어져 보다 예측 가능한 글리코실화 mAb를 생산하고 발효 중에 배지 보충제를 추가하여 글리코실화에 관련된 대사 경로를 조작할 수 있게 되었습니다. 또 다른 전략은 mAb 글리코변이체 분리막을 위한 Fcγ 기반 친화성 리간드 사용과 같은 새로운 다운스트림 기술을 구현하는 것입니다.
 

세포주 개발 과정에서 일정 비율의 불안정한 클론, 즉 유전자 복제본의 손실이나 유전자 침묵 효과로 인해 시간이 지남에 따라 생산성이 떨어지는 클론이 발생하는 것은 흔한 일입니다. 적용되는 기술에 따라 불안정한 클론의 비율은 최대 50% 이상이 될 수 있습니다. 그러나 싸토리우스의 셀카 세포주 개발 기술과 같은 성숙한 기술을 사용하면 안정적인 클론의 비율은 80% 이상이 될 수 있습니다.  

거의 모든 세포 시스템은 이질성을 지니고 있어 특수한 기능과 생존율 향상에 기여합니다. 게놈, 후성 유전체, 전사체 및 단백질체 수준에서 단일 세포 이질성에 대한 깊은 이해는 건강한 상태와 질병 상태 모두에서 유기체의 기능에 미치는 영향을 이해하는 데 매우 중요합니다.

하지만 현재 다양한 세포 및 조직 유형에 대한 대부분의 지식은 수백에서 수백만 개의 세포를 함께 분석하는 대량 분석에서 나온 것으로, 세포 이질성의 실제 스펙트럼을 과소평가할 수 있습니다.

현대 기술은 단일 세포 수준에서의 분석을 가능하게 하여 세포 이질성과 그 함의를 이해하는 데 큰 진전을 이뤘습니다:

• 단일 세포 이질성 분석은 줄기세포가 운명을 결정하는 방법과 같은 발달 경로를 명확히 하여 분화된 조직의 발달과 유지에 기여할 수 있습니다. 이는 분화의 누락 또는 잘못된 방향으로 인한 악성 종양을 이해하는 데 중요할 뿐만 아니라 특히 재생 의학 분야에서 매우 중요합니다.
• In 단일 세포 수준에서 세포 이질성을 분석하기 위해서는 전체게놈증폭(WGA)과 같이 SNP 검출 또는 시퀀싱 대상 세포를 이질적인 배경에서 고순도로 선별하고 분리해야 합니다. 셀렉터™는 100% 순도 개별 단일 세포의 자동 식별 및 분리를 위한 완벽한 도구로 다른 방법에 비해 많은 장점을 제공합니다.
• Target 현미경 이미징을 기반으로 세포를 감지하고 분리할 세포를 선택합니다. 이를 통해 형광 표지자뿐만 아니라 표적 세포가 발현할 수 있고 현미경으로 볼 수 있는 뚜렷한 형태학적 특징을 통해 표적 세포를 선택할 수 있습니다. 이를 통해 형광 표지자 없이도 표적 세포를 무표지 검출할 수 있습니다. 또한 분리 중 라이브 이미지와 분리된 각 단일 세포의 채취 전후 이미지를 자동으로 기록하여 비표적 세포의 오염 없이 표적 세포만 채취했는지 확인할 수 있도록 채취 과정에 대한 포괄적인 문서를 생성합니다. 빠른 분리 프로세스는 매우 부드러워 높은 세포 무결성(복제 어플리케이션에서 최대 100%의 발육률)과 최대 100%의 뛰어난 전송 효율을 제공합니다.