엔브렐 바이오시밀러
엔브렐(에타너셉트)은 종양괴사인자 수용체 (TNFR)의 일부분에 융합된 (즉, 붙은) 인간 IgG1 항체의 Fc 영역을 포함하는 치료적 융합단백질로, 그 치료적 활성은 종양괴사인자-α(TNFα) 에 결합함으로써 발동됩니다. 강력한 염증성 사이토카인인 TNFα는 여러 가지 염증성 질환에 관여하며, 이러한 TNFα에 결합하는 엔브렐은 다수의 바이오시밀러가 EMA / FDA 승인을 받은 상태에 있습니다.
보다 저렴한 엔브렐 바이오시밀러를 제조할 수 있다면 더 많은 환자가 첨단 바이오의약품의 수혜를 입을 수 있는 기회를 제공해 줄 수 있음에 분명하나, 다른 바이오시밀러와 마찬가지로 엔브렐 바이오시밀러 또한 개발과 특성분석 공정이 지난하고 복잡하다는 난제를 마주하고 있습니다. 특히 엔브렐 바이오시밀러의 경우에는 융합 단백질을 강력하게 발현시키는 것이 매우 어렵다는 점까지 고려한다면, 신뢰성 높은 세포주 공급사를 확보하는 것이 엔브렐 바이오시밀러 생산을 성공으로 이끌 수 있는 가장 중요한 요소라고 할 수 있을 것입니다.
싸토리우스는 TNFα를 표적으로 하는 바이오시밀러의 개발 및 제조 전 공정을 풍부한 경험으로 지원하며, 특히 싸토리우스의 CellcaCHO 세포 발현 플랫폼은 고수율 세포주의 생산에 있어 그 성능이 확실하게 입증된 솔루션으로, 이를 적극 활용하여 후속 다운스트림 공정을 최적화 할 수 있습니다. 싸토리우스의 GMP 세포은행, 특성분석 서비스를 도입하시게 되는 경우 기존 솔루션에서 싸토리우스 솔루션으로 원활하게 이행할 수 있도록 지원하여 드리며, 이를 통해 첫 GMP 배치 생산을 가장 빠르게 실시할 수 있도록 모든 노력을 기울여 엔브렐 바이오시밀러 생산 공정을 최적화하여 드리고 있습니다.
바이오시밀러 특성분석, 보다 간단하게
싸토리우스는 엔브렐 바이오시밀러의 포괄적 특성분석을 위한 검증된 분석법을 다음과 같이 제공하고 있습니다.
바이오시밀러 개발 공정에 가치 있는 정보의 확보
개발 시간 단축
규제요건 충족
완제의약품의 품질에 대한 높은 확신성
바이오시밀러 개발에 수반되는 위험의 저감
엔브렐의 특성
작은 신호전달 단백질인 TNFα은 우리 몸이 정상적인 면역기능을 발휘하는데 있어 핵심적인 역할을 담당하는 물질입니다. 주로 만성염증과 연관된 질환을 가진 환자의 조직과 체액에서 종양괴사인자, 즉 TNF의 농도가 높게 나타나는 것을 확인할 수 있습니다.
엔브렐은 TNF-α를 억제하는 것을 작용 기전으로 삼기 때문에 중증 류마티스 관절염, 소아기 특발성 관절염, 중증 건선, 강직성 척추염과 같은 다양한 만성염증질환에 대응합니다.
엔브렐은 인간 IgG1의 Fc 부분에 75-kD의 TNFR(TNFR2/p75)의 리간드 결합부위가 유전적으로 융합된 구조의 융합 단백질로, 주로 TNFα에 선제적으로 경쟁 결합하여 TNFα의 작용을 억제하는 방식으로 작용합니다. 엔브렐의 TNFR에 해당하는 부분, 즉 유인 수용체가 수용성 TNFα에 높은 친화성으로 결합함에 따라 세포(막)의 TNFR에 결합할 TNFα가 남아나지 않도록 하는 것이 엔브렐의 작용 기전입니다.
한편, TNFα는 우리 몸의 면역계통에 있는 세포를 조절하는데 기여하는 외인적 사이토카인으로, 감염 및 그에 따라 생성되는 염증 반응에 따라 면역 세포로부터 분비되게 됩니다. TNF가 면역세포 표면의 수용체에 결합하게 되면 복잡한 신호전달망을 가동하게 되고, 이 과정에서 NFκB, MAPK, 세포사멸경로가 활성화되게 됩니다.
이와 같은 과정을 거쳐, 세포 내의 TNFα 신호전달이 염증의 증폭으로 이어지게 되는데, 엔브렐이 TNFα에 선제적으로 결합함으로써 염증이 증폭되지 않도록 제한하는 원리가 작용하게 됩니다.
세포주 개발에서 완제의약품 분석까지 망라하는 엔브렐 바이오시밀러 프로젝트의 전 공정에서 싸토리우스의 솔루션을 도입, 활용할 수 있습니다. 싸토리우스의 특성분석 솔루션은 고객사 공정에 즉시 도입이 가능하며, 다양한 유관 규제를 준수할 수 있도록 설계되어 있습니다.
물리화학적 / 구조적 분석은 바이오시밀러의 구성에 대한 세부정보를 도출하는데 활용됩니다.
결합 분석은 바이오시밀러의 HER2 및 기타 면역계통 구성요소에 대한 결합을 정량 평가하는데 활용됩니다.
바이오검정은 바이오시밀러의 생물학적 활성도를 직접 평가, 오리지널 의약품과의 동등성 비교연구에 활용할 수 있는 중요 데이터를 도출하는데 활용됩니다.
분석법
물리화학적 / 구조적 특성분석은 바이오시밀러의 생물학적 활성도, 즉 안전성을 평가하는데 있어 핵심이 되는 공정입니다.
다양한 물리화학적 분석법의 수행이 가능한 싸토리우스의 플랫폼으로 동등성 비교연구 수행의 기초를 수립, 클론 선정에서부터 동등성 비교 본 연구까지 고객사에서 개발 중인 바이오시밀러의 특성을 자세하게 파악할 수 있는 분석전략을 수립할 수 있습니다.
공정에 바로 도입할 수 있는 싸토리우스의 물리화학적 / 구조적 분석법과 결합 분석법, 동등성 비교연구법을 조합하여 바이오시밀러의 구조-기능 관계를 평가, 규제기관의 동등성 평가를 통과할 수 있는 결과를 도출하여 보시기 바랍니다.
싸토리우스 전문가와 상담
싸토리우스에서는 엔브렐의 TNF 억제 효과와 다운스트림 공정에서의 그 영향도를 자세히 분석할 수 있도록 다음과 같은 다양한 세포 기반 중화 바이오검정법을 제공하고 있습니다.
L929 세포 사멸 / 생존성 측정
U937 세포 사멸 / 생존성 측정
U937 세포 사멸 측정
HUVEC 세포를 이용한 ELAM-1 (세포 부착 마커) 발현 측정
ICAM-1 (세포 부착 마커) 발현 측정
VCAM-1 (세포 부착 마커) 발현 측정
상기 바이오검정법과 함께 보체의존 세포독성(CDC), 항체의존 세포독성(ADCC) 시험을 병행 실시하시면 동등성 비교연구를 보다 고도화 하실 수 있습니다. 참고로, 상기 검정법은 막결합 TNFα를 발현하는 가공된 세포주를 타겟 세포로 삼아 수행하는 방식입니다.
싸토리우스 전문가와 상담
엔브렐의 다양한 기능을 심도 있게 연구하기 위하여 수행되는 결합 분석은 바이오시밀러의 특성분석 및 동등성 비교연구에서 핵심적인 공정으로 꼽히며, 공정에 즉시 도입 가능한 싸토리우스의 결합 분석법을 도입하여 엔브렐과 TNFα, C1q, FcR, FcRn 간에 일어나는 결합을 손쉽게 분석해 낼 수 있습니다.
엔브렐 TNFα 결합 분석 - 싸토리우스는 전통적인 ELISA법의 업그레이드 버전인 중규모 디스커버리(MSD) 플랫폼 기반의 ELISA법을 활용, 오리지널 엔브렐 대비 엔브렐 바이오시밀러의 상대결합을 대조 로트와 비교함으로써 오리지널 의약품과 바이오시밀러 간의 포괄적인 동등성 분석을 효과적으로 실시하고 있습니다. 이와 같은 방법은 특히 CMO사의 출하승인 시에는 전통적인 ELISA 기반 플랫폼과 병행 활용할 수 있다는 특징이 있으며, 재조합 TNFα 또는 막결합 TNFα를 발현하도록 가공된 세포를 사용하여 실시하는 방법이 되겠습니다.
엔브렐 FcR 분석
다양한 기능을 갖춘 label-free 시스템, SPR 장비를 사용하여 고도의 민감도를 자랑하는 엔브렐 FcR 분석은 BioOutsource를 통해 제공하고 있습니다. BioOutsource에서 지원하는 엔브렐(에타너셉트) FcR 분석은 다음과 같습니다.
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 I(FcRI) 결합 분석
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 IIa(FcRIIa) 결합 분석
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 IIb(FcRIIb) 결합 분석
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 IIIa (V)(FcRIIIa V) 결합 분석
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 IIIa (F)(FcRIIIa F) 결합 분석
SPR 기반 엔브렐 Fc-감마 수용체 IIIb(FcRIIIb) 결합 분석
엔브렐 FcRn 분석
엔브렐 바이오시밀러 및 오리지널 엔브렐에 대한 SPR 기반 FcRn 결합 분석 관련 풍부한 노하우를 자랑하는 싸토리우스의 엔브렐 FcRn 결합 분석 서비스를 도입, 결합친화상수(KD) 값을 결정하는데 활용할 수도 있습니다.
엔브렐 C1q 분석
엔브렐(에타너셉트)의 활성도는 TNFα와의 상호작용 여하에 따라 조절됩니다. 엔브렐이 막결합 TNFα에 결합하게 되면 보체 캐스케이드를 활성화, 보체의존 세포독성에 의한 세포용해를 유도하게 되는데, 이와 같은 보체의 활성화를 C1q 결합 ELISA법으로 확인해 낼 수 있습니다.
싸토리우스 전문가와 상담
