고성능 고처리량 유세포분석을 통한 세포자멸사 분석

정상적인 조직 발달과 항상성에 반드시 필요한 과정인 세포자멸사는 세포가 적시에 거치도록 예정된 세포사를 말합니다. 암, 자가면역질환, 신경변성 등 인간에게서 나타나는 다양한 질병은 병리학적으로 세포자멸사 신호의 이상과 관련이 있습니다. 대부분의 경우 세포자멸사 유도는 미토콘드리아의 탈분극, 카스파제 활성화, 형질막 변형으로 이어집니다. 다양한 세포자멸사 표지자를 동시에 측정할 수 있으면 이러한 경로를 명확히 파악하고 시간에 따른 작용기전을 보다 잘 이해할 수 있습니다.


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분석 개요

유세포분석을 통한 세포자멸사 분석 소개

그림 1. iQue® 인간 4-Plex 세포자멸사 키트를 사용한 세포자멸사 표지자 측정. 1) 미토콘드리아 탈분극, 2) 카스파제 3/7, 3) 아넥신 V, 4) 생존성 없음. 키트 구성요소는 따로 사용할 수도 있고, 노워시 형식으로 함께 사용할 수도 있습니다. 세포자멸사 시약을 다른 iQue® 시약과 함께 노워시로 활용하는 것도 가능합니다.

주요 장점

세포자멸사 분석의 주요 장점

  • 시약을 다양하게 조합해 여러 경로로 세포자멸사 검출 및 확인
  • 확실한 세포자멸사 진행 측정 및 작용기전 이해
  • 세척, 고정 작업 없이 96웰 또는 384웰로 혼합 즉시 분석하는 간편 프로토콜

시약을 다양하게 조합해 여러 경로로 세포자멸사 검출 및 확인

그림 2. 세포독성 및 세포증식억제 화합물을 통한 다양한 세포 건강 프로파일 생산 - Jurkat(1e6/mL) 세포를 다양한 농도의 화합물 4종으로 24시간 동안 처리합니다. 그 다음, iQue®️ 인간 4-Plex 세포자멸사 키트로 분석합니다.

(A) iQue Forecyt®️의 히트 맵으로 카스파제 3/7 발현 세포를 확인할 수 있습니다.

(B,C,D,E) 각각 탈분극된 미토콘드리아, 카스파제 3/7, 아넥신 V, 생존성 없는 세포의 비율을 나타냅니다.

확실한 세포자멸사 진행 측정 및 작용기전 이해

그림 3. 세포자멸사 유도 약물로 처리하자 시간에 따라 증가하는 세포 건강 표지자
Jurkat(1e6/mL)을 다양한 농도의 스타우로스포린으로 처리하고, 3개의 세포자멸사 시약으로 처리한 뒤 2시간, 6시간, 24시간이 경과한 후 20µL의 샘플을 분석했습니다. (A) 2시간 후 카스파제 양성 세포(%)를 나타내는 히트 맵, (B) 미토콘드리아 탈분극, (C) 카스파제, (D) 아넥신 V.

세척, 고정 작업 없이 96웰 또는 384웰로 혼합 즉시 분석하는 간편 프로토콜

그림 4. 혼합 즉시 분석하는 간편 세포자멸사 분석 과정 도식

주문 정보

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iQue®️ 인간 4-Plex 세포자멸사 키트

플랫폼: iQue®️ 3 BR/VBR & iQue®️ Plus BR/VBR과 호환

크기

카탈로그 번호

1 x 384

90053

5 x 384

90054

20 x 384

90155

50 x 384

90156


세포자멸사 시약

플랫폼: iQue®️ 3 BR/VBR & iQue®️ Plus BR/VBR과 호환
제품검출 채널

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카탈로그 번호

iQue® 인간 카스파제 3/7

B/Green

5 x 384
20 x 384
50 x 384

91034
91035
91036

iQue® 인간 아넥신 V

B/Yellow

5 x 384
20 x 384
50 x 384

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91031
91032

iQue® 미토콘드리아 막 전위

R/Red

5 x 384
20 x 384
50 x 384

91038
91039
91040

iQue® 세포막 완전성

B/Red

5 x 384
20 x 384
50 x 384

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90347
90348


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관련자료

문헌 및 문서

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포스터: ELRIG 2014

Labcyte Echo 액체 분주기와 Intellicyt iQue 스크리너 HD를 사용한 고처리량 Multiplex 세포자멸사 분석

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포스터: SLAS 2014

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인포그래픽

세포 건강 및 생존성 평가를 위한 고성능 유세포분석 접근법

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적용분야 노트

노워시 4-plex 세포자멸사 스크리닝 키트 개발과 표현형 스크리닝 검증

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적용분야 노트

다양한 경로의 세포자멸사를 통한 세포 진행 평가

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