실시간 세포 이미징 및 분석으로 오가노이드 인사이트 최대화하기
인간 질병에 대한 연구 중에서도 특히 재생의약품과 정밀의료 치료제는 혁신적인 시험관 내 3D 세포 배양 모델을 바탕으로 발전했습니다. 체내의 병리생리학적 특성을 닮은 구조, 형태, 기능을 가진 3D 고급 세포 모델은 예측 연구와 중개 연구에 사용되고 있습니다. 그러나 오가노이드의 관련성을 확립하고 개선해 임상적 결과를 도출하려면 가변성을 줄이는 동시에 인사이트를 확대할 수 있는 접근법이 필요합니다. 체외 인간 모델 배양 기술의 혁신은 과학적 가능성을 열어주었지만, 복잡한 세포 모델의 특성분석에 사용되는 기존 기술에는 다음과 같은 한계가 존재합니다.
- 환경 통제 문제와 오가노이드 세포 건강을 해치는 부적절한 3D 세포 배양 프로토콜로 인해 가변성이 발생할 수 있습니다.
- 처리량이 낮아 스크리닝에 맞춰 규모를 조절할 수 없습니다.
- 오가노이드 세포 성장, 사망, 또는 형태를 주관적으로 무작위 평가합니다.
- 오가노이드 이미지를 획득하려면 시간과 비용이 많이 소요되고 수작업이 필요합니다.
- 엔드포인트 분석용 타사 소프트웨어나 추가 형광 표지자가 필요하고, 획득할 수 있는 정량적 정보가 제한적입니다.
Incucyte® 오가노이드 분석은 실시간 무표지 분석을 사용해 생리학적으로 관련성 높은 조건에서 다중 변수 오가노이드 모니터링을 효율적이고 신뢰성 높게 수행하는 최적화된 분석 프로토콜과 소프트웨어를 통해 3D 오가노이드 분석 과정의 어려움을 해결해줍니다. 쉽게 사용할 수 있는 Incucyte® 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈로 오가노이드 인사이트를 확보하고, 새로운 치료제를 개발해 보시기 바랍니다.
적용분야
Incucyte® 오가노이드 분석 적용분야
이제 병리생리학적으로 관련성 높은 환경에서 연속적으로 오가노이드를 자동 획득하고 평가할 수 있습니다.
시간에 따른 무표지 이미지 획득 및 분석 기술을 통해 3D 세포 배양 모델에서 관련성 높은 데이터를 확보해 보시기 바랍니다. Incucyte® 오가노이드 분석법은 확실한 프로토콜과 특수 소프트웨어를 사용해 배양기 안에서 마이크로플레이트 포맷으로 오가노이드의 크기, 수, 형태를 연속 획득하고 객관적으로 분석합니다.
Matrigel®에 포매된 오가노이드의 분석 결과를 시간별로 추적 및 정규화하여 배양액 교란 없이 재현성 높고 생리학적으로 관련성 있는 데이터를 생성할 수 있습니다.
주요 장점
Incucyte® 오가노이드 분석의 주요 장점
오가노이드 자동 위치 파악 및 분석
Matrigel®에 포매된 오가노이드를 연속적으로 추적하여 성장과 형태 특성을 평가합니다.
그림 1. Incucyte® 실시간 세포분석 시스템을 사용해 오가노이드 표현형을 동역학적으로 모니터링 - 마우스 장 오가노이드, 간 오가노이드, 건강한 인간의 뇌 오가노이드를 96웰 플레이트에 시딩(50% Matrigel®)하고 Incucyte®로 이미징했습니다. 시딩 후 3D로 촬영한 명시야 동영상과 이미지를 통해 3D 세포 배양액 내 세포 유형에 따라 특이적으로 나타나는 형태와 성장 특성을 볼 수 있습니다.
무표지 분석으로 오가노이드 성장/사망 정량화
Incucyte® 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈로 오가노이드의 실시간 다중 변수 분석을 수행해 치료제의 결과를 보다 확실히 예측합니다.
매개체(0.1% DMSO)
장 매개체
스타우로스포린(1µM)
장 스타우로스포린
간 매개체
간 스타우로스포린
그림 2. 자동 무표지 오가노이드 정량화 - 96웰 플레이트에서 마우스 장 오가노이드(1:6 분할)와 간 오가노이드(세포 1K개/웰)를 Matrigel®에 포매(50%)한 뒤 4~10일 동안 이미징했습니다. 타임랩스 동영상과 시간별 명시야 데이터를 통해 매개체로 처리한 오가노이드의 크기가 시간에 따라 증가했으며, 스타우로스포린은 3D 세포 배양액에서 오가노이드의 성장을 억제했음을 알 수 있었습니다.
그림 3. 화합물 처리에 대한 반응으로 나타나는 오가노이드의 형태 변화 측정 - 명시야 이미지는 간 오가노이드(세포 1K개/웰) ± 단백질 키나아제 억제제 스타우로스포린(1µM, STP)을 나타냅니다. 매개체로 처리한 오가노이드는 크와 수기가 모두 증가하지만, STP가 있으면 눈에 띄는 감소가 관찰됩니다. 확대 이미지와 시간별 데이터 또한 STP가 있으면 오가노이드가 시간에 따라 특유의 둥근 표현형을 잃고(편심률 증가) 어두워짐을 보여줍니다.
효율성 및 재현성 개선
높은 재현성을 제공하는 확립된 프로토콜로 96웰 플레이트 분석 포맷에서 오가노이드를 형성해 데이터 일관성을 높여줍니다.
그림 4. 실험실 테스트를 거친 Incucyte® 오가노이드 분석 프로토콜 - 확립된 간편 분석과정을 통해 높은 재현성으로 오가노이드를 생성할 수 있어 이미지를 기반으로 한 고처리량 특성분석이 가능합니다.
그림 5. 가이드가 있어 사용이 쉬운 인터페이스 - 자동 이미지 및 분석 툴을 통해 설정만 하면 자동으로 분석이 진행됩니다. 실시간으로 어디서든 96웰 플레이트를 사용해 3D 세포 배양액의 오가노이드 성장과 죽음을 추적할 수 있습니다.
주문 정보
주문 정보
제품 | Qty. | Cat. No. |
|---|---|---|
| Incucyte® 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈 (Incucyte® SX5, S3, SX1 실시간 세포분석 시스템용 모듈 선택 가능) | 1 모듈 | 9600-0034-A00 |
