세포 수 및 생존성

세포 계수는 생명과학부터 의료 진단까지, 다양한 실험에서 일상적으로 사용되는 표준적인 실험 절차입니다. 세포 계수와 생존성 평가는 세포 건강 특성분석에 있어 중요한 단계입니다. 세포 수 및 생존성 정보는 확산 속도 모니터링, 성장 조건 최적화, 후속 연구를 위한 세포 데이터 정규화에 활용할 수 있습니다.

최적의 결과를 위해서는 정확하고 반복성 있는 세포 수와 생존성 측정이 필요합니다. 기존의 세포 수 및 생존성 측정 방법은 처리량이 낮고, 선형성이 부족하고, 시간이 많이 소요되며, 정확하고 재현성 높은 실시간 세포분석에 적합한 이벤트 샘플링이 불가능한 경우가 많습니다.

iQue® 세포 계수 및 생존성 키트는 96웰 및 384웰 플레이트의 대규모 선형 범위에 걸쳐 일관적인 정확도를 제공합니다. 또한 세포 표지부터 분석까지, 세포 희석이 필요 없는 간소화된 워크플로를 통해 다양한 비부착 세포주의 절대 세포 수와 생존성 데이터를 재현성 있게 분석해줍니다. iQue® 고성능, 고처리량 유세포분석 솔루션이 효율적이고 정확한 세포 수 및 생존성 정량을 도와드립니다.


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분석 개요

iQue® 세포 계수 & 생존성 키트 분석 개요

세포 수 및 생존성을 정량적으로 분석해주는 싸토리우스의 분석 솔루션은 iQue® 플랫폼과 BR 및 VBR 설정에 최적화되어 있으며, 고처리량 샘플링 기능과 유세포분석 검출 기능을 함께 제공합니다. 또한, 세포 라벨링부터 분석까지 한층 간편한 과정을 통해 폭넓은 비부착 세포주를 바탕으로 한 대규모 선형 범위에 걸쳐 절대적인 세포 수와 생존성을 신속하게 분석해줍니다.

검증된 시약과 프리셋 게이팅 전략 및 분석 템플릿이 포함되어 있고, 신속한 노워시 분석으로 고객이 제공하는 세포를 사용한 생존 세포 식별 및 샘플 밀도 측정 기능을 제공합니다.

기초 분석 과정

  • 미희석 세포를 생존성 염료와 1:1로 혼합하고 10~30분 동안 배양합니다.
  • 계수 비드를 웰에 첨가합니다.
  • iQue® 플랫폼(BR 및 VBR 설정)으로 플레이트를 분석합니다.

주요 장점

생물학적 실험 과정의 정확도 및 재현성 향상

Multiplex 방식의 세포 계수 및 생존성 평가를 통해 뛰어난 실험 결과를 보장합니다.



그림 1. 폭넓은 범위에 걸쳐 재현성 있고 정확한 세포 수 및 생존성 측정

(A) 폭넓은 범위의 민감도에 걸쳐 선형적인 상관관계를 수립할 수 있도록 성장 중인 세포와 가열하여 사멸시킨 세포(Jurkat, Raji, 또는 Ramos 세포주)를 다양한 비율로 혼합하여 실험했습니다.

(B) 다양한 밀도의 Jurkat 세포를 비교하여 세포 계수의 선형 범위를 파악했습니다. 미희석 세포는 8×104 ~ 2×107개/ml 범위의 밀도로 신뢰성 높게 측정했습니다.

고처리량 분석 수행 

96웰 또는 384웰 플레이트로 폭넓은 선형 범위에 걸쳐 세포 생존성과 수를 효율성 있게 정량화합니다.

그림 2. 히트 맵과 프로파일 맵을 통한 실용적 데이터 확보

96웰 플레이트에 제한희석한 CHO-S 세포를 플레이팅하여 제한희석 클로닝을 수행했습니다. 그 다음, 궤도형 쉐이커를 사용해 37°C, 습도 5%로 세포를 배양했습니다. 에지 효과(edge effect)를 방지하기 위해 바깥쪽 웰에는 배지만 사용했습니다. 그리고 iQue® 세포 계수 및 생존성 키트를 사용해 세포 밀도와 생존성을 측정했습니다. 다중 기준[(세포 밀도 > 30만 개/ml) AND (생존성 > 75%)]을 만족하는 웰만 강조 표시된 프로파일 맵이 생성되었습니다. 프로파일 맵의 각 지표를 조정하고 싶은 경우, 그래프 상단의 슬라이더 바를 드래그하거나 마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 수정하면 일치 결과가 표시된 맵이 자동으로 업데이트됩니다. 일치 결과는 CSV 파일로 추출해 hit picking이나 기타 후속 분석에 활용할 수 있습니다.

(A)  세포 밀도 히트 맵

(B) 생존성 히트 맵

(C) 밀도 및 생존성 기준보다 높은 일치 결과를 보여주는 프로파일 맵

귀중한 샘플 절약

소량의 샘플(10µL)로도 분석이 가능하므로 중요한 후속 분석을 위해 샘플을 아낄 수 있습니다.
 

그림 3. 소량의 샘플(10µL)로도 가능한 간편 분석 프로토콜로 세포 및 설정 시간 절약

생산성 최대화

세포 희석과 세척이 필요 없는 신속하고 간편한 프로토콜로 실험 과정이 간단해집니다.


그림 4. 게이팅 및 분석 템플릿

내장된 프리셋 게이팅, 획득 설정, 분석 템플릿을 iQue® Forecyt 소프트웨어로 불러와 세포 수 및 생존성 측정에 사용할 수 있습니다.

주문 정보

주문 정보

플랫폼: iQue® 3/iQue® Screener Plus - VBR 및 BR Configurations와 호환

제품

크기

Cat. No.

iQue® 세포 계수 및 생존성 키트

1 x 96웰

BA-97110

5 x 96웰

BA-97111

1 x 384웰    

BA-97112

5 x 384웰    

BA-97113


관련자료

문헌 및 문서

적용분야 노트

높은 처리량으로 생존 가능한 세포 밀도 측정하기

iQue® 고성능 유세포분석 플랫폼을 사용해 높은 처리량으로 생존 가능한 세포 밀도를 측정합니다.

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