면역세포 클러스터링 및 확산이란?
T림프구 등 면역반응 중 활성화된 면역체계 세포는 빠르게 증식해 감염이나 질병에 맞서 싸웁니다. 활성화된 면역세포 사이에서는 다양한 상호작용 또한 발생합니다. 예를 들어, T세포는 항원제시세포와 상호작용하고, 다른 T세포와도 상호작용합니다. 이처럼 세포 수와 세포 간 상호작용에서 나타나는 동적인 변화는 면역반응의 효과와 범위를 조절하는 데 반드시 필요합니다. 때문에 새롭고 효과적인 항암 면역치료제를 개발하려면 면역세포 활성화, 확산, 조절 기전을 이해해야 합니다.
분석 소개
Incucyte® 면역세포 클러스터링 & 확산 분석 소개
면역세포 상호작용과 확산을 실시간으로 시각화하고 정량화하세요. 면역세포 활성화(확산)와 조절 및 분화(클러스터링) 기전을 배양기 내에서 세포 리프팅이나 라벨링 없이 분석할 수 있습니다.
주요 장점
실시간 시각화 및 자동 분석
- 배양액을 배양기에서 꺼내지 않고 확산과 세포 간 클러스터링 상호작용을 실시간으로 모니터링합니다.
- 직관적인 IncuCyte® 이미지 분석 소프트웨어의 자동 이미징 및 분석 기능을 사용해 무표지 방식으로 클러스터를 계수합니다.
- 이미지와 동영상으로 표현형 인사이트를 확보합니다.
그림 1. 무표지 T세포 응집 검출 - PBMCs를 항CD3 항체와 IL-2로 활성화하면 T세포의 응집, 즉 ‘클러스터링’이 유도됩니다. 사용자 친화적인 IncuCyte® 소프트웨어를 사용하면 시간에 따른 세포 클러스터링 과정을 정확하게 정량화할 수 있습니다(청색 마스킹).
전체 과정을 세포 배양기 내에서 모니터링
- 면역세포 클러스터링 및 확산의 동역학적 특성에 대한 처치의 효과를 파악합니다.
- 실험이 끝날 때까지 안정적인 배양기에서 배양액을 꺼내지 않아도 됩니다.
그림 2. 실시간 클러스터링 측정 - 처치 효과를 시간에 따라 자동 분석합니다. IL-2(10ng/ml)로 처리한 항CD3 항체의 농도를 0.01µg/ml에서 10µg/ml로 높이면 T세포 클러스터링을 촉진할 수 있습니다.
세척, 세포 리프팅, 항체 라벨링 불필요
- 라벨링 필요 없이 확산과 클러스터링을 측정합니다.
- 설정만 하면 이미지 캡처 및 분석이 자동으로 완료됩니다.
- 뛰어난 호환성으로 유세포분석과 엔드포인트 방식의 생화학 측정 분석법과 함께 사용할 수 있습니다. 분석이 완료되면 세포/상층액을 꺼내기만 하면 됩니다.
실시간 무표지 PBMC 확산 모니터링
Incucyte® 실시간 세포분석 시스템은 항CD3 항체와 IL-2로 활성화한 PBMC의 확산(황색 마스킹)을 144시간에 걸쳐 자동 정량화합니다. 항CD3 항체 및 IL-2로 처리한 경우, 항CD3 항체만 사용한 경우, 그리고 활성제를 사용하지 않은 경우 PBMC 확산의 전체 과정을 확인할 수 있습니다.
연구자료
Incucyte® 추천 연구자료
Zumwalde NA, Domae E, Mescher MF, Shimizu Y. ICAM-1-dependent homotypic aggregates regulate CD8 T cell effector function and differentiation during T cell activation(T세포 활성화 중 ICAM-1 의존 동형 응집체의 CD8 작동 T세포 기능 및 분화 조절). J Immunol, 191(7):3681–93, 2013
IncuCyte ZOOM® 실시간 이미징 및 세포 클러스터링 분석으로 활성화된 T세포의 응집 기전을 분석했습니다.
“T세포 클러스터는 CD8+ T세포 기능과 최종 분화를 조절한다. 이러한 연구는 초회항원자극 중 T세포 상호작용과 교차대화의 필요성에 대한 이해를 넓혀준다. 어쩌면 클러스터 조작을 통해 백신과 항암 면역치료제의 효과를 높일 수 있을지도 모른다.”
Zumwalde, N. A. The Role of ICAM-1 Mediated T cell:T cell Interactions on CD8+ T cell Effector Function and Differentiation(ICAM-1 매개 T세포의 역할: CD8+ 작동 T세포의 기능 및 분화에 대한 T세포 상호작용). PhD Dissertation, University of Minnesota (2013)
