제품 개요
세포의 형태는 세포 건강과 상태에 대해 귀중한 인사이트를 제공합니다. 그리고 아주 간단한 세포계도 상당한 이질성을 가지고 있습니다. 세포의 활성화나 분화 과정에서 세포 하위 군집의 동적인 표현형 변화를 연구하고 처치에 대한 세포의 반응을 이해하는 것은 치료제의 효과를 개선하는 데 매우 중요합니다.
기존 세포분석 접근법의 경우 세포의 형태 변화를 모니터링하고 정량화하려면 여러 단계의 과정이 필요하고, 약물 처치에 대한 반응을 측정하기 위해서는 시약이 필요하다는 한계가 있습니다. 기존 방식의 대표적인 단점은 아래와 같습니다.
- 현미경으로 한 번의 실험을 수행해도 샘플을 배양기에서 반복적으로 꺼내야 하기 때문에 세포 건강이 손상될 수 있습니다.
- 형광염료를 사용한 엔드포인트 분석은 분석 결과의 가변성을 초래할 수 있습니다.
- 단일 지표를 바탕으로 하기 때문에 웰별 측정 재현성이 낮고, 데이터 처리량이 낮아 스크리닝용으로 규모를 확대할 수 없습니다.
- 시간과 비용이 많이 소요되는 수작업 과정으로 이미지를 획득해야 하고, 이 이미지는 다시 타사 소프트웨어를 사용해 분석해야 하기 때문에 복잡한 데이터 처리가 필요해 정량화를 주관적이고 제한적인 방식으로 수행하게 됩니다.
Incucyte가 기존 접근법의 한계를 극복할 수 있도록 도와드립니다.
Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용하면 세포를 무표지 방식으로 계수하고, 이후 세포의 영역, 편심률, 형광 강도를 기준으로 부착성 또는 비부착성 세포 모델을 세포별로 분류하여 혼합 배양액의 하위 군집에서 나타나는 동적 변화를 정량화할 수 있습니다.
라벨링 없이 세포를 추가 연구하고 싶다면 Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석 소프트웨어 모듈과 Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 함께 사용해 형태 변화를 자동으로 식별하고 정량화할 수 있습니다. 또한, 위상 HD 이미지를 통해 형태를 기준으로 세포자멸 세포 등 원하는 세포를 무표지 식별하고 실시간 정량화할 수 있습니다. 고성능 머신 러닝으로 무표지 분석을 최대화하세요.
적용분야
세포별 분석
세포 단위의 분석은 전체 군집 측정을 통해 확보할 수 있는 정보 이상의 가치 있고 풍부한 생물학적 인사이트를 제공합니다. Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어 모듈과 관련 비교란성 시약은 세포 하위 군집의 실시간 이미지 캡처와 객관적 분석이 가능한 통합 솔루션을 제공합니다. 마이크로플레이트 단위의 높은 처리량으로 어떤 비균질 배양액도 분석해 보세요.
고성능 무표지 분류 분석 소개
이제 편향 없이 고성능 학습 알고리즘으로 세포 형태의 변화를 자동으로 식별하고 분석할 수 있습니다.
무표지 이미지 분리와 다변량 세포 형태 분석 기능으로 부착세포를 계수하고 형태 변화를 추적해 보시기 바랍니다. 반복적이고 객관적인 분석이 가능한 스마트한 기본 세팅을 사용하면 여러 실험 결과를 일관적으로 비교할 수 있습니다. Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석 소프트웨어 모듈은 형태를 바탕으로 타깃 군집을 간편하게 식별할 수 있는 확립된 무표지 획득 프로토콜과 고성능 분석 프로토콜을 사용한 즉각적인 솔루션입니다.
Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석과정
분석과정: Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석 솔루션으로 생세포/사멸세포 무표지 분석을 수행하는 데 필요한 단계를 나타낸 분석과정. 먼저 Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어 모듈로 이미지를 자동 획득하고 분리합니다. 그리고 고성능 무표지 분류 애드온으로 형태 특징을 파악한 뒤, 생세포 및 사멸세포 대조군 웰을 사용해 분류 기능을 훈련시킵니다. 학습을 마친 분류 기능을 모든 웰과 시점에 적용하면 이미지당 생세포와 사멸세포의 수와 비율을 알 수 있습니다.
주요 장점
- 형태를 바탕으로 한 자동 무표지 세포 분류 - 생세포와 사멸세포를 구별하고 분화 상태를 파악할 수 있는 통합 이미지 획득 및 분석 기능으로 라벨링 시약이 유발할 수 있는 인공물을 줄여 생물학적 인사이트를 확대합니다.
- 편향 없는 세포 형태 분석 - 특수 설계된 강력한 세포 분화 무표지 분류 소프트웨어를 사용해 반복성 높은 실험 결과를 획득합니다.
- 무표지 표현형 스크리닝 수행 - 머신 러닝을 사용해 처리량이 뛰어난 96웰 또는 384웰 포맷에서 이미지를 바탕으로 세포 형태를 분석합니다.
- 다변량 알고리즘으로 객관적이고 반복성 높은 결과 획득 - 단일 변수를 사용할 때보다 정확하게 세포 형태를 정량화할 수 있습니다.
형태를 바탕으로 한 자동 무표지 세포 분류
생세포와 사멸세포를 구별하고 분화 상태를 파악할 수 있는 통합 이미지 획득 및 분석 기능으로 라벨링 시약이 유발할 수 있는 인공물을 줄여 생물학적 인사이트를 확대합니다.
그림 1: 고성능 무표지 분류 검증: 생세포/사멸세포 분석 - 다양한 형태를 가진 6종의 세포를 서로 다른 농도의 캄프토테신(CMP, 0.1~10µM), 스타우로스포린(STP, 1~1000nM), 시스플라틴(CIS, 0.5~50µM)과 Incucyte® Annexin V 시약으로 처리하여 무표지 생세포/사멸세포 분석을 수행했습니다. 이미지는 Incucyte® 부착세포 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용해 획득 및 분리했고, 사멸세포는 고성능 무표지 분류 기능과 형광 분류(아넥신 V) 기법을 모두 사용해 정량화했습니다. 좌측 이미지는 CMP로 처리한 A549 세포, STP로 처리한 HeLa 세포, CIS로 처리한 HT1080 세포의 생세포 및 사멸세포 형태를 나타냅니다. 고성능 무표지 분석의 시간별 데이터를 보면 72시간 동안 사멸세포의 비율이 증가하고, 아넥신 V 분석의 시간별 데이터에서는 72시간 동안 아넥신 V에 양성인 세포의 비율이 증가합니다. 두 방식의 시간별 데이터와 농도반응곡선은 비슷합니다.
편향 없는 세포 형태 분석
특수 설계된 강력한 세포 분화 무표지 분류 소프트웨어를 사용해 반복성 높은 실험 결과를 획득합니다.
그림 2: 고성능 무표지 분류 검증: 분화 - PMA(100nM)를 사용해 THP-1 단핵구를 대식세포 표현형으로 분화시키고 Fabfluor-488로 라벨링된 CD11b(대식세포 표지자)로 처리한 뒤 무표지 분화 분석을 수행했습니다. 이미지는 Incucyte® 부착세포 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용해 획득 및 분리했고, 대식세포는 고성능 무표지 분류 기능과 형광 분류(CD11b) 기법을 모두 사용해 정량화했습니다. 위상 HD 및 형광 블렌딩 이미지는 세포가 단핵구에서 대식세포로 분화하면서 나타나는 형태의 변화와 CD11b의 발현 증가(녹색 형광)를 보여줍니다. 대식세포의 시간별 비율을 보면 시간에 따라 분화된 세포가 증가하며, CD11b의 상향조절보다 형태 변화가 약간 더 먼저 발생하는 것을 알 수 있습니다(0~24시간). 두 방법 모두 대식세포 군집의 최대 80%에서 분화가 정체되었습니다.
무표지 표현형 스크리닝 수행
머신 러닝을 사용해 처리량이 뛰어난 96웰 또는 384웰 포맷에서 이미지를 바탕으로 세포 형태를 분석합니다.
그림 3: 무표지 세포독성 스크리닝 - 고성능 무표지 분류를 사용해 세포독성제를 식별했습니다. 세포는 96웰 스크린에서 서로 다른 작용기전을 가진 14개의 화합물로 처리했습니다. 세포사를 유도하는 10µM의 CMP도 사멸세포 대조군으로 포함시켰습니다. 사멸세포의 비율은 고성능 무표지 분류 기능으로 정량화했습니다. 96웰 플레이트 딥 뷰 화면을 보면 처치 72시간 후 생세포(녹색)와 사멸세포(적색) 분류 마스킹을 통해 어떤 화합물과 농도가 세포독성을 나타내는지 신속하게 간편 확인할 수 있습니다.
다변량 알고리즘으로 객관적이고 반복성 높은 결과를 획득해 단일 변수를 사용할 때보다 정확하게 세포 형태를 정량화
그림 4: 다변량 분석을 통한 무표지 분류의 정확도 향상 - A549 세포를 다양한 농도의 CMP(0.1~10µM)로 처리해 세포사를 유도했습니다. 사멸세포의 비율은 전체 형태에 대한 고성능 무표지 분류 기능(다변량 분석, 왼쪽), 또는 세포의 원형성을 나타내는 단일 지표 분석(일변량 분석, 오른쪽)으로 정량화했습니다. 시간별 데이터는 시간에 따른 각 방법의 사멸세포 비율을 보여줍니다. 고성능 무표지 분류 기능으로 분석한 경우, 시간 및 농도에 따라 예측했던 세포사 증가가 나타났습니다. 분석 결과는 아넥신 V 검증 연구 결과와 비슷했습니다. 세포 원형성에 대한 일변량 분석의 경우, 72시간 후 농도에 따라 세포사가 증가했으나 매개체에서 시간에 따라 변하는 높은 수준의 세포사가 관찰되었습니다. 이 데이터는 시각적 이미지 분석으로 뒷받침되지 않습니다.
그림 5: 형광 시약을 사용하거나 사용하지 않고 Incucyte® 세포별 분석 또는 고성능 무표지 형태 분석 기능으로 검증한 세포 유형별 요약 표 - 형광 시약을 사용하거나 사용하지 않고 여러 종류의 세포에 대해 생세포/사멸세포 구별 분석을 수행한 뒤, Incucyte® 세포별 분석 또는 고성능 무표지 형태 분석 기능으로 결과를 검증했습니다. Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석으로 생성한 무표지 데이터는 형광 시약을 사용한 분석과 비교했을 때 동등하고 재현성 있는 결과를 나타냈습니다.
주문 정보
주문 정보
제품 | Qty. | Cat. No. |
|---|---|---|
| Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어 모듈 | 1 모듈 | 9600-0031 |
Incucyte® 고성능 무표지 분류 분석 소프트웨어 모듈 | 1 모듈 | BA-04867 |
