고성능 유세포분석을 이용한 항SARS-CoV-2 IgG, IgM, IgA 검출

BSL-3 실험실에서 작업하는 경우가 아니라면 코로나19 환자 샘플은 BSL-2 실험실에서 취급하기 전에 잠재적인 바이러스 오염을 불활화할 수 있도록 처리해야 합니다.  1시간 동안 56˚C에서 가열하거나, 특정 화학적 계면활성제로 처리하는 등 검증된 여러 바이러스 불활화 방법을 문헌에서 찾아볼 수 있습니다.  어떤 방법을 사용하든 바이러스가 효과적으로 불활화되었는지 반드시 검증해야 합니다.  싸토리우스의 분석에서 사용된 샘플은 실온에서 5~10분 동안 4% 트리톤 X-100을 사용해 불활화했습니다. 샘플 채취 후에는 iQue^® 장비가 각 분석이 끝나거나 장비를 종료할 때마다 자동으로 청소를 진행합니다.  다른 유세포분석 시스템과 마찬가지로 분석 과정에서 만들어지는 폐기물은 적절히 오염을 제거한 후 지역 규제에 따라 폐기해야 합니다.

키트는 96웰 플레이트 1개~5개, 384웰 플레이트 1개~5개용으로 구성되어 있습니다. 원하는 포맷을 선택하여 구매 가능합니다.  실제 샘플의 수는 실험에 사용되는 희석 샘플의 수와 배수에 따라 다를 수 있습니다.

이 분석 키트는 보정 기능, 자동으로 농도반응곡선을 생성하는 사전 정의된 분석 템플릿 등이 포함된 iQue^® 고성능 유세포분석 플랫폼과 함께 사용하도록 개발되었습니다.  적은 샘플이 필요하다는 점도 고처리량 iQue^® 고성능 유세포분석 플랫폼만의 특징입니다. 특히 iQue^® 플랫폼은 샘플 필요량이 적어 이 분석에는 사전 희석된 혈청 또는 혈장 샘플이 10µL밖에 필요하지 않고, 최종 세척 후에도 획득 전 10µL의 버퍼만 추가하면 됩니다.  그 밖의 시스템은 샘플을 훨씬 더 많이 사용해야 할 수 있습니다.

RBD는 현재 백신과 마찬가지로 오리지널/WT SARS-CoV-2 바이러스주에서 유래되었습니다.  

이 키트는 정성적 또는 정량적 분석이 가능하며, 일반적으로 낮은 피코그램부터 높은 나노그램 단위의 농도까지, 폭넓은 범위를 검출할 수 있습니다.  예를 들어, 많은 수의 샘플을 사용하는 초기 스크리닝 연구의 경우 정성적 분석이 유용할 수 있습니다.  정성적 연구는 검출 수준이 30~60pg/mL으로, 코로나19 음성 혈장 샘플을 바탕으로 한 음성 문턱값보다도 훨씬 낮습니다.  정량적 분석의 최소정량한계(LLOQ)는 이보다 훨씬 높으며, Ab 동형에 따라 다릅니다.  예를 들어, IgG Ab의 정확한 정량을 위한 선형 범위는 키트에 포함된 Ab 표준물질을 사용하고 96웰 플레이트의 한 줄(row)이나 384웰 플레이트의 한 컬럼(column)에 1:3 연속희석 곡선을 준비하는 경우 약 50ng/mL ~ 300pg/mL입니다.

96웰 또는 384웰 플레이트에 샘플을 첨가하면 원하는 만큼 샘플을 반복실험할 수 있습니다.  여러 플레이트로 샘플을 나눈 다음, 같은 표준 항체 곡선을 사용해 모든 테스트 샘플을 보간할 수도 있습니다.