iQue Qbeads^®

96웰 또는 384웰 플레이트로 분비 단백질을 신속하게 정량화해 스크리닝 및 프로파일링 연구 속도 향상

그림 1. 384웰 분석 포맷으로 최소한의 시간 안에 사이토카인 분비 정량

림프구 혼합배양반응(MLR) 분석을 위해 여러 공여자에게서 채취한 PBMC(80K/웰)를 단독으로(단일 공여자 대조군) 또는 함께(총 공여자 8쌍) 시딩했습니다. 그리고 세포를 다양한 농도의 항CTLA4 관문억제 항체로 처리했습니다. 히트 맵은 384웰 분석 플레이트의 분비 IFNγ를 나타냅니다. 20분 안에 384웰 플레이트 고속 분석이 완료되었습니다.   

맞춤 패널이나 사전 설정된 패널을 사용해 하나의 샘플로 최대 30개의 분비 단백질 농축물 분석 가능

그림 2. iQue Forecyt^® 소프트웨어 시스템으로 쉽고 신속한 데이터 분석
  
가지세포를 라벨링한 CD4 양성 T세포와 함께 시딩하고(T세포:가지세포 = 3:1), 펨브롤리주맙으로 처리한 뒤 2일 차와 6일 차에 iQue Qbeads^® 인간 염증 패널 키트를 사용해 분석했습니다. 모든 키트에는 포함된 분석물에 따라 사전 정의된 분석 템플릿이 함께 제공됩니다. (A) 게이팅 템플릿을 사용해 형광 특징을 바탕으로 Qbeads를 분리했습니다. (B) 하나의 웰을 중복 실험하여 Qbeads로 여러 염증 사이토카인의 기준 분비량을 측정했습니다. (C) 분비 단백질과 사이토카인을 보여주는 iQue Forecyt^® 히트 맵과 농도반응곡선을 통해 데이터 경향을 뚜렷하게 확인할 수 있습니다. 

iQue Qbeads^®를 다른 iQue^® 키트나 항체와 함께 사용해 세포 기능과 하위 군집 동시 분석

그림 3. 분비된 신호 분자와 세포 기능의 Multiplex 정량
  
Dynabeads 또는 CD3-CD19 BiTE(이중 특이적 T세포 관여항체)를 사용해 T세포를 활성화하고, iQue Qbeads^® Plexscreen을 사용해 사이토카인 생성을 캡처 및 분석했습니다. 또한, 동시에 같은 웰로 iQue^® 세포막 완전성 키트를 사용해 세포 생존성을 평가했습니다. Dynabeads와 비교해 BiTE로 처리한 T세포에서 사이토카인이 더 적게 생성되어 타깃 세포 살해 증가와의 상관관계를 확인할 수 있습니다. (A) 히트 맵을 통해 T세포 활성제의 농도 증가에 따른 TNFα의 분비 농도를 알 수 있습니다. (B)와 (C)는 각각 Dynabeads 및 BiTE로 처리해 T세포를 활성화한 뒤 IFNγ 분비 농도반응곡선을 나타냅니다. (D)와 (E)는 각각 Dynabeads 및 BiTE로 처리했을 때 세포 생존성을 보여줍니다.    

2µL의 샘플 필요량, 노워시 프로토콜로 결과 도출에 필요한 시약 비용과 시간 절감

그림 4. iQue Qbeads^® Plexscreen 키트 분석과정

(A) iQue Qbeads^® Plexscreen을 사용해 분석물 농도를 간단히 측정하는 과정을 도식으로 나타낸 것입니다. (B) iQue Qbeads^® 분석 빌더는 최대 30개의 분비 단백질 농도를 하나의 웰로 분석할 수 있는 유연한 분석 포맷을 제공합니다. (C) iQue Qbeads^®의 뚜렷한 식별 기능과 iQue Forecyt^® 소프트웨어 군집 게이팅을 통한 세포 특성분석을 보여줍니다.